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项目介绍

慢病毒载体是一类重组逆转录病毒载体，由于其结构和功能的特点，慢病毒载体作为一种重要的基因转移工具应用于基因治疗和细胞分子生物学研究领域。区别于一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型细胞，达到良好的基因治疗效果。

特点：1.大大提高对于一些较难转染的细胞，如原代细胞、干细胞、不分裂的细胞等转导效率

2.目的基因整合到宿主细胞基因组的概率大大增加

3.快速获得高水平的表达

4.具有最低的细胞毒性，将免疫反应降到最低

5.能够插入较大的片段（≈ 3kb）

实验流程：

制备编码慢病毒颗粒的重组病毒质粒及其三种辅助包装原件载体质粒，分别进行高纯度无内毒素抽提，用本公司的转染试剂 RNAi-Mate 共转染293T细胞，转染后6h更换为完全培养基，培养72h后，收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，对其浓缩，得到高滴度的慢病毒浓缩液，用于感染目的细胞。感染后的目的细胞可以通过慢病毒载体上的抗性基因和荧光融合蛋白进行筛选。