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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

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项目介绍

聚丙烯酰胺凝胶电泳（Polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE），是一种常用的根据蛋白质分子量大小分离样本中蛋白质和多肽的技术。PAGE有非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳（Native-PAGE）和变性聚丙烯酰氨凝胶电泳（蛋白质变性剂通常为SDS）。Native-PAGE过程中蛋白质能保持完整状态，并依据分子量大小、形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。而SDS-PAGE仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。

样品要求

1.检测组织量要求为100mg（即黄豆大小）；

2.细胞量要求为10^6及以上，细胞收集方式——贴壁细胞：倒掉培养基，pbs清洗2-3次，用细胞刮收集细胞，2000g，离心5min，然后去掉上清液，细胞沉淀干冰运输；悬浮细胞：2000g，离心5min，然后收集细胞沉淀，干冰运输；

3.血液样本：全血采用EDTA-抗凝管装，至少1ml，4度运输，血清或白细胞采用干冰运输；

4.剩余样本需要返还的项目，需要提前备注。在收到项目完整版结题报告一个月内告知公司，逾期样本将安排清理。如果样本特别珍贵，需提前说明。一般情况下，样本不予返还；样本返回需要送样方承担返还费用（主要是干冰费和快递费）。

项目案列

常见问题

1.如何读取SDS-PAGE结果

电泳后肉眼无法观察到蛋白分离，需要后续的染色技术。考马斯亮蓝染色和银染是常规检测和定量电泳分离蛋白质的常用方法。经过固定-染色-脱色等简单处理后，可以清楚的观察到蛋白质的分布。

2.如何储存SDS-PAGE凝胶

通常在每次实验之前准备新鲜的SDS-PAGE凝胶。然而凝胶也可以在4℃的清水的储存约一周。如果凝胶染色后不能及时拍照，则需要将其放入水中，以防止凝胶干燥和收缩。建议尽快拍摄染色结果，如果凝胶长时间浸泡在水中，条带会散开

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深度解析：免疫印迹实验挑战传统蛋白质认知

2024-06-12

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